Vad är ELISA-metoden?

ELISA-metoden är ett test som används i immunologi och andra vetenskapliga områden för att påvisa antikroppar och antigener. ELISA står för enzyme-linked immunosorbent assay , som hänvisar till det faktum att antikroppar kopplade till enzymer används för att fastställa resultatet av testet. ELISA-metoden används i läkemedel för att påvisa antikroppar mot sjukdomar som en diagnostisk åtgärd, och är en vanlig teknik som används i immunologiska och biokemisk forskning.

ELISA-testet utvecklades på 1960-talet och 1970-talet som ersättning för immunologiska tester som innebar användning av radioaktiva antikroppar och antigener. Riskerna med att använda radioaktiva ämnen som testprocessen tungrodd osäkra, och tillkomsten av Elisa-metoden löser båda dessa problem. Istället för att använda radioaktivt material för att fastställa resultatet av ett test, använder ELISA enzymer som reagerar med antikroppar mot färgade tyger. Utvecklingen av färg i ett ELISA-test visar ett positivt resultat. Det finns flera olika typer av ELISA-test. Den mest använda ELISA-metoden kallas indirekt ELISA; det här är ett antikroppstest som används för att avgöra om en viss typ av antikroppar finns i ett prov, och i vilken koncentration. Inom diagnostisk medicin, är detta test används för att påvisa förekomst av antikroppar mot infektionssjukdomar som hiv, hepatit och andra. Förekomsten av antikroppar mot dessa sjukdomar visar att den enskilde som testas har varit utsatt för infektiösa agens. Normalt är det urval som används i patientens blod. I det här testet är ett specifikt antigen protein som används för lackering av en mikrotiterplatta. Detta lilla innehåller plastplatta 96 små brunnar, och en enda ELISA-test kan utföras i varje brunn. Det antigen som används för ett visst prov beror på vilken typ av antikropp testet försöker att upptäcka. Till exempel, om ELISA används för en HIV-test, skulle antigenet användas specifikt för detta virus. När testet vinning, är små mängder av det okända provet tillsätts varje brunn på mikrotiterplatten , och plattan inkuberas att ge tid för antikroppar i provet att binda till antigenet. Nästa, en sekundär detektionsantikropp tillsätts varje brunn i plattan. Om provet innehåller något av antikroppen typ som håller på att testas för, kommer det att binda till den sekundära detektionsantikropp under den efterföljande inkubationstiden.

Nyckeln till ELISA-metoden är att den sekundära antikroppen är märkt med en viss typ av enzym. Det enzym som används kan ändra färgen på provet när den reagerar med sitt substrat. Därför Om ett prov innehåller någon av de antikroppar som testas för, att lägga till substratet som väl kommer att kunna ändra färg, beroende på närvaron av den sekundära antikroppen och dess enzym.

Det finns andra varianter på ELISA metod, bl. a. ett test som kallas sandwich ELISA. Detta används för att påvisa antigen i ett prov, snarare än antikroppar. I det här testet är mikrotiterplattan överdragna med ett standardiserat urval av antikroppar. Därefter är det antigen provet till, följt av tillsättning av sekundär detektionsantikropp med tillhörande enzym. Som med indirekt ELISA, bildandet av en färgad produkt indikerar ett positivt resultat.


Kommentarer

  • Om oss
  • Reklam
  • Kontakta redaktören
  • Få nyhetsbrev
  • RSS-feed

Redaktör: Beáta Megyesi
Nyheter redaktör: Christiane Schaefer

Kundservice: Mats Schaefer,
Helena Löthman

Tel: +46 00 79 22 00
Fax: +46 00 79 22 01

© Copyright 2014 Debok.net - All rights reserved.