Vad är Fluorescent in situ hybridisering Technique?

Fluorescent in situ hybridisering, som också kallas fluorescens in situ hybridisering, är vanligtvis kallas fisk. Det är en teknik som innebär att man använder en kort DNA-sträng märkta med en fluorescerande färg för att upptäcka genetiska avvikelser. FISH kan utredarna att visualisera kromosomer, delar av kromosomer, eller specifika gener snabbt och exakt. Detta är ofta används för att fastställa prognos och behandling för vissa sjukdomar, särskilt cancer.

FISH används för att avgöra om kromosomer har avvikelser. Detta kan inkludera kromosomala deletioner, omstruktureringar eller flyttning, där två kromosomer har bytt segment. FISH gör det också möjligt för utredarna att visualisera specifika gener. Det kan avgöra om en viss gen är närvarande, om det ligger på kromosomerna, och om flera kopior är närvarande. Detta kallas gener.

Den genetiska makeup av en person som finns i deras DNA, som ligger i kärnan av alla sina celler. DNA har två delar som är gratis till varandra. Med andra ord har de molekyler som kallas baspar som matchar varandra exakt. Gener är delar av DNA som har en viss sekvens av baspar och ligger på specifika områden av kromosomer. Gener ärvs och hur celler fungerar, men de kan också bli muterade om sekvensen av DNA-baspar förändringar.

fluorescent in situ hybridisering teknik drar fördel av gratis karaktär av DNA-strängar. Utredarna först skapa en sond. Detta är en kort, enkel DNA-sträng som är ett komplement till den genetiska sekvensen prövaren är ute efter. Sonden är då märkta eller knutna till ett fluorescerande färgämne.

Celler från sjuk vävnad, till exempel en tumör biopsi, vanligen utgör provexemplar skall undersökas av fisk. Provet upphettas att denaturera DNA i cellkärnorna. Detta innebär att den dubbla DNA-strängar i provet cellerna sönder och bildar inre delar. En särskild FISH sonden sedan hybridiseras med provet. Med andra ord är sondens entrådig införas och säkringar med gratis enda del i det denaturerade provet celler.

Med hjälp av en speciell fluorescerande mikroskop, ser forskare på provet. Om särskild gen eller kromosom finns i provet cellerna, visas det som ett fluorescerande ljus mot en mörkare bakgrund. Forskare kan lätt se om genen är närvarande eller inte, och om det är, hur många kopior av genen i varje cell. Om forskaren letar efter platsen för en gen kan han eller hon kan se var på kromosomen den är. En regelbunden ljusmikroskop kan inte användas med fisk, eftersom fluorescerande färg avger en mycket låg nivå av ljus.

Användning av DNA-hybridisering med sonderna var först genomföras på 1960-talet, men var de prober märkta med radioaktiva ämnen i stället för lysrör sådana. Detta hade flera problem. Radioaktiva ämnen är till sin natur instabila, farliga och kräver särskilda protokoll för bortskaffande. Det tar också lång tid att mäta den radioaktiva signal som skickas av den hybridiserade sonden. Fluorescent in situ hybridisering teknik övervinner de flesta av dessa hinder.

Om utredarna vet vad genen de söker, är FISK snabb och korrekt att finna den. FISH kan även utföras även om cellerna inte aktivt dela, och det ger mer specifik information om avvikelser i kromosomer. Mer konventionella metoder, såsom karotyping bara berätta utredare antalet och storleken av kromosomer i en cell.

Fluorescent in situ hybridisering har nackdelar. Eftersom nyckeln till FISH är att veta i vilken ordning baspar och /eller placering av en gen, kan det inte användas som en screeningmetod. Det är också dyrare än andra, mindre specifika metoder och kanske inte finns i alla laboratorier och sjukhus.

fördelar och nackdelar med fluorescent in situ hybridisering beskrivs bäst genom exempel. Fisk är rutinmässigt i bröstcancer diagnos för att avgöra om en patient har flera kopior av en gen som kallas HER2. Detta tyder oftast på en mer aggressiv form av bröstcancer, och att patienten ska få vissa mediciner som en del av deras behandling. FISH kan användas för detta eftersom baspar sekvens och kromosom placering av HER2-genen är kända. Däremot kan fisk inte användas för att bestämma vad okänd gen eller gener har orsakat bröstcancer, eller för att upptäcka bröstcancer i allmänhet.


Kommentarer

  • Om oss
  • Reklam
  • Kontakta redaktören
  • Få nyhetsbrev
  • RSS-feed

Redaktör: Beáta Megyesi
Nyheter redaktör: Christiane Schaefer

Kundservice: Mats Schaefer,
Helena Löthman

Tel: +46 00 79 22 00
Fax: +46 00 79 22 01

© Copyright 2014 Debok.net - All rights reserved.